淀粉的測定方法【君翰銳儀】

谷物中淀粉的測定

(一)方法要點

淀粉在稀酸的作用下，可以水解為糊精和麥芽糖，*后全部轉(zhuǎn)化為葡萄糖，再測定葡萄糖，推算出淀粉的含量。

(二)儀器

電熱烘干箱。

(三)試劑

1.1%鹽酸水溶液 量取23毫升濃鹽酸加水至1升。

2.10%氫氧化鈉溶液10克氫氧化鈉定容至100毫升。

3.10%中性醋酸鉛溶液 稱取100克醋酸鉛溶解在水中定容至1升，用中速定量濾紙過濾。

4.甲基紅指示劑 稱取0.5克甲基紅溶解在100毫升水中。

5.0.1%碘—碘化鉀溶液 稱取2克碘化鉀、1克碘溶解在少量水中，定容至1升，儲存在棕色瓶中。

6.斐林試劑A稱取34.64克五水硫酸銅溶解在少量水中，定容至500毫升容量瓶中，搖勻。

7.斐林試劑B稱取173克酒石酸鉀鈉和50克氫氧化鈉溶于200毫升水中定容至500毫升，搖勻。

8.0.5%亞甲基藍(lán)指示劑 稱取0.5克亞甲基藍(lán)溶于100毫升水中。

9.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液  稱取已干燥的葡萄糖(一級)0.2000克，用少量水溶解后定容至100毫升，此為2毫克/毫升標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。

10.硫酸鈉飽和溶液

(四)分析步驟

1.水解 稱取風(fēng)干磨細(xì)通過60目篩的樣品0.5000克放入300毫升具塞的三角瓶中，加入1%鹽酸水溶液150毫升，塞緊塞子，放在105℃烘箱中加熱水解，在水解過程中要不斷搖動三角瓶，4小時后取出，用玻璃棒取出少許帶固體的懸浮液，放在白瓷板上，加1滴0.1%碘—碘化鉀溶液，如固體不顯藍(lán)色，紅色或紫色，說明水解完全，所取試樣須無損倒回三角瓶中，洗凈，洗液全部收集在原三角瓶中。如水解不完全，繼續(xù)加熱30分后再檢查，直到水解完全。

水解結(jié)束后，冷至室溫，加入甲基紅指示劑3滴，用10%氫氧化鈉中和溶液至微黃色，不可過量，然后再逐滴加入中性10%醋酸鉛溶液5～10毫升，以沉淀蛋白質(zhì)，靜置片刻，待上部溶液澄清后，再加入幾滴醋酸鉛溶液，檢查蛋白質(zhì)是否沉淀完全。繼續(xù)滴加醋酸鉛溶液直至無白色絮狀的蛋白質(zhì)沉淀產(chǎn)生為止(絮狀沉淀與其他沉淀分清)。

將水解液用中速定量濾紙過濾于250毫升容量瓶中，用水洗滌燒瓶和沉淀數(shù)次，定容至刻度，搖勻。

用吸管準(zhǔn)確吸取50毫升清液于100毫升容量瓶中，逐滴加入5～7毫升飽和硫酸鈉溶液以除去過量的醋酸鉛至不再產(chǎn)生白色硫酸鉛沉淀為止，加水定容后過濾，即得由淀粉水解而得到的葡萄糖溶液。

2.滴定

(1)斐林試劑的標(biāo)定

1)吸取斐林試劑A、斐林試劑B各5毫升于250毫升三角瓶中，用滴定管放入10毫升葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，在酒精燈上加熱至沸，加亞甲基藍(lán)指示劑5滴，在沸騰的條件下繼續(xù)用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液中的藍(lán)色消失為終點。記下全部葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液用量V₁。

2)吸取斐林試劑A、斐林試劑B各5毫升，放于250毫升三角瓶中，再由滴定管放入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液V₁-1毫升，然后加熱煮沸2分，加入亞甲基藍(lán)指示劑5滴，在沸騰條件下繼續(xù)用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴至藍(lán)色消失即為終點，記下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積V₀。從沸騰開始到滴定完畢必須3分完成。

(2)樣品的測定

1)吸取斐林試劑A、斐林試劑B各5毫升于250毫升三角瓶中，用滴定管放入100毫升樣品葡萄糖溶液，在酒精燈上加熱至沸，加亞甲基藍(lán)指示劑5滴，在沸騰的條件下，繼續(xù)用樣品葡萄糖溶液滴定至藍(lán)色消失即為終點，記下消耗樣品葡萄糖溶液的體積V₂。

2)準(zhǔn)確吸取斐林試劑A、斐林試劑B各5毫升于250毫升三角瓶中，再由滴定管放入V₂-1毫升樣品葡萄糖溶液，然后加熱煮沸2分，加入亞甲基藍(lán)指示劑5滴，在沸騰下繼續(xù)用樣品葡萄糖溶液滴至藍(lán)色消失即為終點，記下消耗樣品葡萄糖溶液的體積V，從沸騰開始到滴定完畢必須在3分內(nèi)完成。

(五)結(jié)果計算

淀粉(%)=糖標(biāo)準(zhǔn)浴液濃度5(毫克/毫升)×V₀×0.9×100/(m×50×250×V/100)

式中：0.9——葡萄糖換算為淀粉的系數(shù)(162.1/180.1=0.9);

m——樣品的質(zhì)量(克)。